George Papanicolau fue un médico griego que desarrolló la tinción para citología conocida hoy en día como tinción de Papanicolau. Fue estando en Nueva York cuando desarrolló su propia línea de investigación, queriendo demostrar que los cromosomas X e Y definían el sexo de la descendencia experimentando con conejillos de indias.

Durante su etapa de investigación formó equipo con su mujer, Andromahi Mavrogeni, con la que trabajaría durante más de 45 años. Los muestreos vaginales que hacía a los conejillos y posteriormente miraba al microscopio le llevaron a descubrir que existía un ciclo reproductivo en los conejillos. A partir de ahí empezó a recoger muestras exfoliativas vaginales de su esposa y otras mujeres para observar los cambios celulares en el ciclo reproductivo.

En el hospital en Nueva York inició una investigación en la que se recogía con una espátula, una muestra de citología exfoliativa a las pacientes en el servició de ginecología para que posteriormente Papanicolau la interpretara al microscopio, estableciendo así una relación entre los patrones celulares y los cambios en el útero y ovarios.

Con los resultados obtenidos a partir de este trabajo publicó "El ciclo sexual en la hembra humana mostrado por frotis vaginales” y posteriormente presentaría su investigación para la detección temprana del cáncer del cuello uterino. La toma de este tipo de muestras vaginales para estudio de anomalías celulares y prevención precoz del cáncer de cérvix es conocida hasta la actualidad como test de Papanicolau.

Para el estudio microscópico de estas muestras George Papanicolau supo encontrar una técnica de fijación y coloración de las células para que estas tuviesen una conservación adecuada. Es lo que actualmente conocemos como tinción de Papanicolau. Si observamos células escamosas procedentes de una citología exfoliativa sin teñir, al microscopio se verían tal que así

Como podemos observar en la foto, es muy difícil estudiar las atipias en una célula que está sin teñir. Apenas distinguimos un pequeño núcleo central y se dibuja muy débilmente el final del citoplasma, esto, en una foto con un objetivo a muchos aumentos.

La tinción de Papanicolau consiste en pasar las laminillas de citología por una serie de colorantes, alcoholes y xiloles con la finalidad de poder apreciar mejor los detalles celulares. Los núcleos se teñirán de azul-morado con el colorante de hematoxilina y el orange G se encargará de teñir el citoplasma en aquellas células maduras y queratinizadas dándole un color anaranjado. El EA-50 es una tinción polícroma formada por tres colorantes que son los que darán el color al epitelio escamoso simple, de manera que las células basófilas quedarán de color azulado mientras que las oesinófilas quedarán rosadas.

El protocolo de tinción sería el siguiente:

1- 10 pases (ni lentos ni rápidos) en el alcohol de 80 %

2- 10 pases en alcohol al 70 %

3 - 10 pases en alcohol al 50 %

4 - 10 pases en agua destilada

5 - Hematoxilina de Harris por 3 minutos (tiempo variable)

6 - Pases en agua destilada (hasta quitar el exceso de colorante).

7 - 6 pases en HCl (alcohol clorhídrico) al 0.5 %.

8 - Agua corriente por cinco min. (chorro lento).

9 -10 pases en agua destilada.

10 - 10 pases en alcohol al 50 %

11 - 10 pases en alcohol al 70 %

12- 10 pases en alcohol al 80 %

13 - 10 pases en alcohol al 96 %

14 - Colocar en Naranja G por 1 ½ minutos (tiempo variable)

15 - 10 pases en alcohol al 96 %

16 - 10 pases en alcohol al 96 %

17 - Colorear en EA-50 por 3 min. (tiempo variable)

18 - 10 pases en alcohol al 96 %.

19 - 10 pases en alcohol al 96 %.

20 - 10 pases en alcohol al 96 %.

21 - 10 pases muy lentos en Isopropanol (dejar un rato para que se deshidraten y después secar bien)

22 - 10 pases muy lentos y dejando un buen rato para que se deshidraten bien, en la mezcla de Isopropanol-Xilol.

Después de seguir todos los pasos de la tinción las células se vería así:

Se ve diferente, ¿verdad?

Quería contaros la historia de Papanicolau porque en el mundo de la medicina en general y en el de la citología en concreto, fue un descubrimiento que lo cambió absolutamente todo. Un descubrimiento que, a día de hoy, se utiliza en todo el mundo para la detección precoz de cáncer de cérvix.

Espero que os haya parecido interesante y...

¡¡¡HASTA EL SIGUIENTE POST!!!

---

Del Cuerpo al Microscopio: Toma de Muestra Del Cuerpo al Microscopio: Procesado de la Muestra Del Cuerpo al Microscopio: Diagnóstico Del Cuerpo al Microscopio: ¿Qué es una PAAF?

---

@mdcomes

Imágenes de @mdcomes